新冠核酸檢測標本處理哪些不符合安全管理規(guī)定

檢測人員基本要求

實驗室檢測技術人員應具備相關專業(yè)的大專以上學歷或具有中級及以上專業(yè)技術職務任職資格，并有2年以上的實驗室工作經(jīng)歷和基因檢驗相關培訓合格證書。實驗室配備的工作人員應與所開展檢測項目及標本量相適宜，以保證及時、熟練地進行實驗和報告結果，保證結果的準確性。

二、標本安全管理

標本轉運箱封閉前，須使用75%酒精或0.2%含氯消毒劑噴灑消毒。

標本包裝應符合國際民航組織文件Doc9284《危險品航空安全運輸技術細則》的PI602分類包裝要求。涉及外部標本運輸?shù)?，應按照A類感染性物質進行三層包裝。疑似或確診患者標本應標示有特殊標識，并進行單獨轉運。檢測完成后標本，若檢測結果為陰性，剩余標本及核酸可在結果報告發(fā)出24小時后裝入專用密封廢物轉運袋中進行壓力蒸汽滅菌處理，隨后隨其他醫(yī)療廢物一起轉運出實驗室進行銷毀處理；若檢測結果為陽性，剩余標本應進行復核檢測。

三、實驗室檢測安全管理

1.基本要求

標本滅活及檢測應在生物安全二級實驗室進行，同時采用生物安全三級實驗室的個人防護。開展新冠病毒核酸檢測的實驗室應制定實驗室生物安全相關程序文件及實驗室生物安全操作失誤或意外的處理操作程序，并建立實驗室環(huán)境消毒處理記錄。

2.實驗前安全要求

應使用0.2%含氯消毒劑或75%酒精進行桌面、臺面及地面消毒。消毒液需每天新鮮配制，不超過24小時。轉運至實驗室的標本轉運桶應在生物安全柜內開啟。轉運桶開啟后，使用0.2%含氯消毒劑或75%酒精對轉運桶內壁和標本采集密封袋進行噴灑消毒。取出標本采集管后應首先檢查標本管外壁是否有破損、管口是否泄露或有管壁殘留物。確認無滲漏后，推薦用0.2%含氯消毒劑噴灑、擦拭消毒樣品管外表面（此處不建議使用75%酒精，以免破壞樣品標識）。如發(fā)現(xiàn)滲漏應立即用吸水紙覆蓋，并噴灑有效氯含量為0.55%的含氯消毒劑進行消毒處理，不得對標本繼續(xù)檢測操作，做好標本不合格記錄后需立即進行密封打包，壓力蒸汽滅菌處理后銷毀。

實驗室操作人員在進行標本熱滅活時，溫浴前需旋緊標本采集管管蓋，必要時可用封口膜密閉管蓋；溫浴過程中可每隔10分鐘將標本輕柔搖勻1次，以保證標本均勻滅活；溫浴后標本需靜置至室溫或至少1.Omin使氣溶膠沉降，隨后再開蓋進行后續(xù)核酸提取。

3.核酸提取和檢測安全要求

標本進行核酸提取和檢測時應盡可能在生物安全柜內進行操作。如為打開標本管蓋或其他有可能產生氣溶膠的操作，則必須在生物安全柜內進行。

4.實驗結束后安全要求

需對實驗室環(huán)境進行清潔消毒。

（1）實驗室空氣消毒。實驗室每次檢測完畢后應進行房間紫外消毒30分鐘或紫外消毒機照射消毒1小時。必要時可采用核酸清除劑等試劑清除實驗室殘留核酸。

（2）工作臺面消毒。每天實驗后，使用0.2%含氯消毒劑或75%酒精進行臺面、地面消毒。

(3)生物安全柜消毒。實驗使用后的耗材廢棄物放入醫(yī)療廢物垃圾袋中，包扎后使用0.2%含有效氯消毒液或75%酒精噴灑消毒其外表面。手消毒后將垃圾袋帶出生物安全柜放入實驗室廢棄物轉運袋中。試管架、實驗臺面、移液器等使用75%酒精進行擦拭。隨后關閉生物安全柜，紫外燈消毒30分鐘。

(4)轉運容器消毒。轉運及存放標本的容器使用前后需使用0.2%含氯消毒劑或75%酒精進行擦拭或噴灑消毒。

(5)塑料或有機玻璃材質物品消毒：使用0.2%含氯消毒劑或過氧乙酸或過氧化氫擦拭或噴灑消毒。

四、實驗室醫(yī)療廢物管理

1.基本要求

開展新冠病毒核酸檢測的實驗室應制定醫(yī)療廢物處置程序及污物、污水處理操作程序。所有的危險性醫(yī)療廢物必須按照統(tǒng)一規(guī)格化的容器和標示方式，完整且合規(guī)地標示廢物內容。應由經(jīng)過適當培訓的人員使用適當?shù)膫€人防護裝備和設備處理危險性醫(yī)療廢物。實驗室應建立醫(yī)療廢物處理記錄，定期對實驗室排風HEPA過濾器進行撿漏和更換，定期對處理后的污水進行監(jiān)測，采用生物指示劑監(jiān)測壓力滅菌效果。

2.醫(yī)療廢物的處理措施

醫(yī)療廢物的處理是控制實驗室安全的關鍵環(huán)節(jié)，必須充分掌握生物安全廢棄物的分類，并嚴格執(zhí)行相應的處理程序。

(1)廢液的處理

實驗室產生的廢液可分為普通污水和感染性廢液。普通污水產生于洗手池等設備，對此類污水應排入實驗室水處理系統(tǒng)，經(jīng)統(tǒng)一處理達標后進行排放。感染性廢液即在實驗操作過程中產生的廢液，需采用化學消毒(0.55%含氯消毒劑處理)或物理消毒(紫外照射30分鐘以上)方式處理，確認徹底消毒滅活后方可排入實驗室水處理系統(tǒng),經(jīng)統(tǒng)一處理達標后進行排放。污水消毒處理效果按GB18466《醫(yī)療機構水污染物排放標準》相關規(guī)定進行評價。

(2)固體廢物的處理

實驗室固體廢物應分類收集。固體廢物的收集容器應具有不易破裂、防滲漏、耐濕耐熱、可密封等特性。實驗室內的潛在感染性廢物不允許堆積存放，應及時進行壓力蒸汽滅菌處理。廢物處置之前，應存放在實驗室內指定的安全位置。小型固體廢物如檢測耗材、個人防護裝備等均需使用雙層防滲漏專用包裝袋打包密封后經(jīng)過壓力蒸汽滅菌處理，再沿醫(yī)療廢物通道轉運出實驗室。

體積較大的固體廢物如HEPA過濾器，應由專業(yè)人士進行原位消毒后，裝入安全容器內進行消毒滅菌。不能進行壓力蒸汽滅菌的物品如電子設備可采用環(huán)氧乙烷熏蒸消毒處理。經(jīng)消毒滅菌處理后移出實驗室的固體廢物需集中交由醫(yī)療廢物處理單位進行處置。

五、實驗室污染的處理

1.標本污染生物安全柜的操作臺造成局限污染時：立即用吸水紙覆蓋，并使用0.55%含氯消毒劑進行噴灑消毒。消毒液需要現(xiàn)用現(xiàn)配，24小時內使用。

2.標本傾覆造成實驗室污染時：保持實驗室空間密閉，避免污染物擴散。立即使用潤濕有0.55%含氯消毒劑的毛巾覆蓋污染區(qū)。必要時（如大量溢撒時）可用過氧乙酸加熱熏蒸實驗室，劑量為2g/m3,熏蒸過夜；或20g/L過氧乙酸消毒液用氣溶膠噴霧器噴霧，用量8m1./m3,作用1-2小時；必要時或用高鎰酸鉀-甲醛熏蒸：高鎰酸鉀8g/m3,放入耐熱耐腐蝕容器（陶罐或玻璃容器），后加入甲醛（40%）10m1./m3,熏蒸4小時以上。熏蒸時室內濕度60%-80虬

3.清理污染物時嚴格遵循活病毒生物安全操作要求，采用壓力蒸汽滅菌處理，并進行實驗室換氣等，防止次生危害。

六、檢測結果反饋要求

1.報告時限

對于發(fā)熱門診、急診患者，在6小時內報告核酸檢測結果；對于普通門診、住院患者及陪護人員等人群，原則上在12小時內報告結果；對于“愿檢盡檢”人群，一般在24小時內報告結果。醫(yī)療機構應為受檢者出具檢測報告，并告知其查詢方式，不得以任何理由不出具檢測報告。

2.檢測報告

應按照《新型冠狀病毒核酸檢測報告單》的參考樣式出具檢測報告，在衛(wèi)生健康行政部門規(guī)定下，互認檢測結果。醫(yī)療機構可采用紙質、快遞、網(wǎng)絡或信息化系統(tǒng)等多種形式，發(fā)放核酸檢測報告，并注意保護個人隱私。發(fā)現(xiàn)核酸檢測陽性結果時應按相關要求在12小時內進行傳染病上報及后續(xù)流行病學調查工作。

提取出的核酸可以在生物安全柜柜外面加嘛

提取出的核酸不可以在生物安全柜柜外面加。提取出的核酸在生物安全柜柜外面加是一種嚴重的違紀行為，這種東西是不可以隨意提取的，必須在專用的設備中中提取。生物安全柜是為操作原代培養(yǎng)物，菌毒株以及診斷性標本等具有感染性的實驗材料時，用來保護操作者本人，實驗室環(huán)境以及實驗材料，使其避免暴露于上述操作過程中可能產生的感染性氣溶膠和濺出物而設計的。

核酸實驗室設計有什么要求?

一、PCR實驗室設計規(guī)范SICOLAB PCR（聚合酶鏈式反應）實驗室又叫基因擴增實驗室 《臨床基因擴增檢驗實驗室管理暫行辦法》（衛(wèi)醫(yī)發(fā)[2002]10號） 《臨床基因擴增檢驗實驗室工作規(guī)范》（衛(wèi)檢字[2002]8號） 二、核酸實驗室設計基本要求SICOLAB 1、試劑準備區(qū)：是PCR實驗室中最為“潔凈”的區(qū)域，它不應有任何核酸成分的存在，否則將嚴重影響檢測結果的準確性。標本的制備應在生物安全柜內進行。 主要設備：冰箱、低溫冰箱、混勻器、微量加樣器（0.2-1000ul）、移動紫外燈。 2、樣本準備區(qū)：核酸提取、貯存，擴增反應管制作。 主要設備：冰箱、超低溫冰箱、高速冷凍離心機、混勻器、微量加

HIV核酸檢測的HIV核酸檢測實驗室要求

HIV核酸檢測應在合適的實驗室中進行，應建立與實驗和實驗室管理相關的標準操作指導書和制定嚴格的管理制度，工作人員必須充分了解各項規(guī)定并嚴格遵照執(zhí)行。 實驗室應設置兩個獨立的工作區(qū)域：核酸擴增前區(qū)和核酸擴增后區(qū)。核酸擴增前區(qū)包
括試劑準備區(qū)和樣品處理區(qū)，設在不同房間或區(qū)域；核酸擴增后區(qū)包括擴增區(qū)和擴增產物分析區(qū)，設在不同的房間或區(qū)域。各區(qū)的功能是：
1.1 試劑準備區(qū)：擴增試劑的儲備、配制和分裝。
1.2 樣品處理區(qū)：樣品登記、處理和分裝；核酸提取、保存和使用，PCR擴增的第一輪加樣。
1.3 擴增區(qū)：核酸擴增。如果在此區(qū)進行套式PCR的第二輪加樣，應在PCR防護罩內進行。
1.4 擴增產物分析區(qū)：擴增產物的電泳、雜交、成像、序列測定、結果分析、登記及報告。
在滿足下列要求的前提下，核酸擴增前區(qū)或核酸擴增后區(qū)可設在一個房間內：
1.4.1 核酸擴增前區(qū)實驗室內設置兩個不同位置的實驗區(qū)，試劑配置在超凈工作臺中操作，樣品處理在生物安全柜內操作。
1.4.2 在核酸擴增后區(qū)使用全封閉的擴增和檢測系統(tǒng)時，如實時熒光PCR儀等。
1.4.3 每個實驗人員使用各自的試劑、耗材、移液器和盛放污染物的盛器。
1.4.4 在實驗前后對操作區(qū)域和共享器具進行清潔及消毒。
1.4.5 各區(qū)域的試劑、器具、儀器和設備為該區(qū)專用，不得交叉使用。 3.1 根據(jù)檢測項目配備相應的設施和設備。
3.2 各區(qū)域的設施和設備為專用，應根據(jù)實驗要求在相應區(qū)域配置。
3.3 試劑準備區(qū)：配置冰箱、超凈工作臺、普通離心機、加樣器、振蕩器、廢棄物容器、可移動紫外燈。
3.4 樣品處理區(qū)：配置-80℃冰箱、生物安全柜、高速制冷離心機、加樣器、振蕩器、制冰器或制冷模塊、恒溫水浴或干浴、上下水設備、廢棄物容器、紫外燈。
3.5 擴增區(qū)：配置核酸擴增儀、普通冰箱、無層流PCR操作柜或超凈工作臺、微型離心機、加樣器、廢棄物容器、紫外燈。
3.6 擴增產物分析區(qū)：配置電泳儀、電泳槽、加樣器、紫外透射儀、攝影/像設備、普通冰箱、普通離心機、恒溫水浴、微波爐、上下水設備、廢棄物容器、紫外燈等。測序儀可安置在其他專門實驗區(qū)。
3.7 各區(qū)域應使用專用或一次性工作服、帽子、口罩鞋套及袖套，配備防紫外線眼鏡。 必須符合艾滋病實驗室的通用生物安全要求。5 .防止核酸殘余污染措施　5.1 嚴格執(zhí)行實驗室分區(qū)制度,防止實驗室核酸殘余（Carry-over）污染措施
5.2 各區(qū)域只用于特定的操作，不得從事其它工作。
5.3 儀器和材料的專用制度
儀器、設備、材料、設施均應按工作區(qū)域進行標識，不得交叉混用。
5.4 單向工作流向制度
5.4.1 實驗室的氣流應從擴增前區(qū)流向擴增后區(qū)，不得逆向流動。建議擴增前區(qū)保持弱正壓狀態(tài)，擴增后區(qū)保持弱負壓狀態(tài)。
5.4.2 實驗人員單向工作流向應該為：試劑準備區(qū)→樣品處理區(qū)→擴增區(qū)→擴增產物分析區(qū)，不得逆向流動。原則上實驗人員在擴增后區(qū)工作后當天不能再返回擴增前區(qū)工作。
5.4.3 實驗用品單向工作流向應該為：試劑準備區(qū)→樣品處理區(qū)→擴增區(qū)→擴增產物分析區(qū)，不得逆向流動。實驗用品包括實驗材料（試劑、樣品和擴增產物）、實驗器材（容器、板架、實驗服、帽子、口罩、手套、鞋套）、辦公用品（記錄紙、筆等）、以及清潔材料等。
5.5 實驗室防止核酸殘余污染的處理程序
5.5.1 實驗前將70%乙醇或0.1～1%次氯酸鈉溶液或涂布于操作臺或器具表面，兩分鐘后用紙巾擦凈。
5.5.2 實驗前移入所需的試劑、耗材、樣品以及盛放污染物的盛器。
5.5.3 用于定性與定量核酸檢測的所有試劑、耗材、移液器等必須分開使用。實驗結束后取出個人專用物品至存放區(qū)；封閉污染物盛器并置入污物袋；取出共用器具至存放區(qū)；將70%乙醇或0.1～1%次氯酸鈉溶液涂布于操作臺或器具表面，兩分鐘后用紙巾擦凈；打開紫外燈照射至少1小時。
5.5.4 定期（每周）對實驗室進行全面清潔，房間內所有工作臺面、地面以及儀器設備表面用70%乙醇或0.1～1%次氯酸鈉清潔，用紫外燈進行臺面和空氣消毒。定期（每月）對移液器進行清潔。
5.5.5 定期（每月）監(jiān)測和報告實驗室核酸殘余污染情況，監(jiān)測部位包括核酸檢測前后區(qū)域各實驗室以及共用走廊等。
5.5.6 每次試驗后，將同批試驗樣品的DNA序列以及與上一批試驗樣品的DNA序列一起進行遺傳進化樹污染分析。 6.1 所有廢棄物應按照HIV污染物品處理。
6.2 化學物品如溴乙啶處理的瓊脂糖凝膠應該按有關方案處理。

核酸pcr步驟

一、個人三級防護穿戴 帶一次性帽子、佩戴醫(yī)用N95、一次性防護服、一次性鞋套、一次性防水靴套、一層乳膠手套、外層一次性隔離衣、防護目鏡、第二層乳膠手套、穿戴完畢后應盡快通過專用緩沖間或者走廊，進入核酸提取區(qū)（專業(yè)核酸提取實驗室）。 ? 二、樣本滅活處理 核酸檢測須有兩名工作人員快速通過進入實驗室，進行滅活實驗操作。生物安全柜內需配備吸水棉與消毒酒精、有條件可配備吸水臺布，對樣本溢灑時進行緊急處理；打開二級容器，用75%酒精消毒物體表面，檢測樣本管密閉性后進行滅活處理，滅活條件（56℃，30min，恒溫樣本滅菌儀等多種方式），取出酒精滅活管用酒精擦拭外表，將樣本放入到生物安全柜內。 三、手工核酸