期末考試題：緊急求助...怎樣篩選高產(chǎn)菌株？（以一細(xì)菌為例）

1 材料和方法 1.1 出發(fā)菌株P(guān).ploymyxa18 3由本實(shí)驗(yàn)室提供。 1.2 培養(yǎng)基 1.2.1 完全培養(yǎng)基(CM) 蛋白胨10.0g,牛肉膏3.0g,葡萄糖5.0g,NaCl5.0g,蒸餾水定容至1L,pH7.0。 1.2.2 基本培養(yǎng)基(MM) MgSO4·7H2O0.25g,KH2PO44.5g,K2HPO4·3H2O10.5g,(NH4)2SO41.0g,檸檬酸三鈉1.0g,葡萄糖1.0g,蒸餾水定容至1L,pH7.0～7.2,滅菌后加入10μg/L的生物素。 1.2.3 發(fā)酵培養(yǎng)液 玉米漿0.03L,淀粉10.0g,(NH4)2SO48.0g,CaCO310.0g,蒸餾水定容

欲以野生型大腸桿菌為出發(fā)菌株通過誘變篩選一株氨基酸營養(yǎng)缺陷型突變株，請?jiān)O(shè)計(jì)實(shí)驗(yàn)方案并簡要陳述理由。

我的見解如下： 1。先要獲得野生型大腸桿菌的純培養(yǎng)物 2。誘變：可以選擇各種誘變法，如紫外線誘變法，將一定濃度的菌液（可分成好幾等分分別做實(shí)驗(yàn)）放在一定強(qiáng)度的紫外燈下照射，那分成的幾等分可以分別照射10S，20S，30S，40S，50S，60S，注意，菌液不可太稀太濃，這個操作應(yīng)該在黑暗的條件下進(jìn)行，只允許有紫外光，以免光修復(fù)造成突變失敗。 3.培養(yǎng)：將上述菌種分別涂抹在配好的完全培養(yǎng)基上（牛肉膏-蛋白胨培養(yǎng)基），倒置培養(yǎng)過夜 4，篩選：配置好基本培養(yǎng)基，再往上面添加一定濃度的氨基酸營養(yǎng)液，除了不要添加你說要得到的營養(yǎng)缺陷的那種氨基酸，必需氨基酸都要添加，再用影印法將3中的菌落印到這些培養(yǎng)基上

賴氨酸高產(chǎn)菌種的篩選與分離，一般產(chǎn)生菌是哪些菌，怎么鑒定啊，產(chǎn)生賴氨酸以后怎么檢測？求高手詳細(xì)啊

現(xiàn)在大生產(chǎn)上有競爭力的賴氨酸生產(chǎn)菌種均是基因工程菌（例如E.COLI)。自然界的細(xì)菌不會積累賴氨酸。菌種的鑒定可以查相關(guān)的手冊如伯杰士手冊上的方法進(jìn)行鑒定。賴氨酸的檢測可以用氨基酸分析儀的方法，也可以用茚三酮顯色的方法。

如何得到一株高產(chǎn)菌株

.1 食醋 食醋是我國勞動人民在長期的生產(chǎn)實(shí)踐中制造出來的一種酸性調(diào)味品。它能增進(jìn)食欲，幫助消化，在人們飲食生活中不可缺少。在我國的中醫(yī)藥學(xué)中醋也有一定的用途。全國各地生產(chǎn)的食醋品種較多。著名的山西陳醋、鎮(zhèn)江香醋、四川麩醋、東北白醋、江浙玫瑰米醋、福建紅曲醋等是食醋的代表品種。食醋按加工方法可分為合成醋、釀造醋、再制醋三大類。其中產(chǎn)量最大且與我們關(guān)系最為密切的是釀造醋，它是用糧食等淀粉質(zhì)為原料，經(jīng)微生物制曲、糖化、酒精發(fā)酵、醋酸發(fā)酵等階段釀制而成。其主要成分除醋酸(3%～5%)外，還含有各種氨基酸、有機(jī)酸、糖類、維生素、醇和酯等營養(yǎng)成分及風(fēng)味成分，具有獨(dú)特的色、香、味。它不僅是調(diào)味佳品，長期食

怎樣通過紫外誘變育種使大腸桿菌高產(chǎn)天冬氨酸酶？

這是常規(guī)UV誘變育種問題。參考書上到處都有。 1.培養(yǎng)菌株至一定OD，制備菌懸液，一般濃度10^8-10^9 cfu/ml 2.涂布平板，晾干。UV輻射不同時間。（15W UV燈，約20-30cm）。 3.避光培養(yǎng)。比較致死率、挑選突變菌株、測量目標(biāo)產(chǎn)物產(chǎn)量、篩選獲得高產(chǎn)克隆。 或者：2‘ 將菌懸液置于UV下，震蕩攪拌，輻射不同時間。涂布平板。其余同1,3. 注意事項(xiàng)：1. 要有對照，2. 要避光誘變和培養(yǎng)防止光修復(fù)，3.可采用LiCl提高誘變效果。