包埋法屬于什么生物技術(shù)
- 教育綜合
- 2023-03-18 07:56:57
包埋法指的是什么?
包埋法是制備固定化酶或固定化細(xì)胞的一種方法,是將酶或細(xì)胞包埋在能固化的載體中。
如將酶包裹在聚丙烯酰胺凝膠等高分子凝膠中,或包裹在硝酸纖維素等半透性高分子膜中,前者包埋成格子型,后者包埋成微膠囊型。包埋法常用于微生物、動(dòng)物和植物細(xì)胞的固定化。
分類
微生物包埋法
包埋法的原理是將微生物細(xì)胞截流在水不溶性的凝膠聚合物孔隙的網(wǎng)絡(luò)空間中。通過聚合作用或者離子網(wǎng)絡(luò)形成,或通過沉淀作用,或改變?nèi)軇?、溫度、pH值使細(xì)胞截流。
凝膠聚合物的網(wǎng)絡(luò)可以阻止細(xì)胞的泄漏,同時(shí)能讓基質(zhì)滲入和產(chǎn)物擴(kuò)散出來。包埋法操作簡單,對細(xì)胞活性影響較小,制作的固定化細(xì)胞球的強(qiáng)度高,目前工業(yè)應(yīng)用上以凝膠包埋法固定細(xì)胞最為廣泛。
共價(jià)結(jié)合法
共價(jià)結(jié)合法是細(xì)胞表面上功能團(tuán)和固相支持物表面的反應(yīng)基團(tuán)之間形成化學(xué)共價(jià)鍵連接,成為固定化細(xì)胞,該法的連接鍵很牢固。
共價(jià)結(jié)合法可分為兩種:一種是先將載體有關(guān)基團(tuán)活化,然后與酶有關(guān)基團(tuán)發(fā)生共價(jià)偶聯(lián)反應(yīng)。另一種是先在載體上共價(jià)連接一個(gè)雙功能試劑,然后將酶共價(jià)偶聯(lián)到雙功能試劑上去。
交聯(lián)法
交聯(lián)法是使用雙功能或多功能試劑,直接與細(xì)胞表面的反應(yīng)基團(tuán)如氨基、羧基等進(jìn)行交聯(lián),形成共價(jià)鍵來固定細(xì)胞,其結(jié)合力是共價(jià)鍵。此法制備的細(xì)胞與載體結(jié)合緊密,但制備麻煩,活力損失較大,常用的交聯(lián)劑有戊二醛、甲苯二異氰酸酯、雙偶氮聯(lián)苯等。
吸附法
又稱載體結(jié)合法,是通過物理吸附、化學(xué)或者離子鍵的結(jié)合,將微生物固定于非水溶性載體。這種方法操作簡單,對微生物活力影響小,但所結(jié)合的微生物數(shù)量有限,反應(yīng)穩(wěn)定性和反復(fù)使用性差。吸附法可分為物理吸附法和離子吸附法。
細(xì)胞生物學(xué)實(shí)驗(yàn)中常用來固定細(xì)胞或細(xì)胞器的方法有哪些
細(xì)胞固定化方法有:Adsorption(吸附);covalent bonding(共價(jià)結(jié)合);Cross linking(交聯(lián));Entrapment(包埋)、Encapsulation(微膠囊) 。下面對這幾種做具體介紹。 一、吸附法 1,原理 利用載體和細(xì)胞表面所帶電荷的靜電引力(van der Walls forces),使細(xì)胞吸附于載體上。吸附法可分為物理吸附和離子吸附兩種。該法操作簡單,固定化過程對細(xì)胞活性影響小。 2,載體的材料 采用吸附法固定細(xì)胞,所用的載體主要有:硅藻土、木屑、多孔玻璃、活性炭、 多孔陶瓷、離子交換樹脂和等。塑料 3,影響吸附固定化的因素 (1)Z-電位 (2)微生物包埋法的介紹
包埋法的原理是將微生物細(xì)胞截流在水不溶性的凝膠聚合物孔隙的網(wǎng)絡(luò)空間中。通過聚合作用或者離子網(wǎng)絡(luò)形成,或通過沉淀作用,或改變?nèi)軇囟?、pH值使細(xì)胞截流。凝膠聚合物的網(wǎng)絡(luò)可以阻止細(xì)胞的泄漏,同時(shí)能讓基質(zhì)滲入和產(chǎn)物擴(kuò)散出來。包埋法操作簡單,對細(xì)胞活性影響較小,制作的固定化細(xì)胞球的強(qiáng)度高,目前工業(yè)應(yīng)用上以凝膠包埋法固定細(xì)胞最為廣泛。