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蘆丁對照品溶液的制備

分光光度中采用標準曲線法測定過程及數據處理的方法分別是什么?

儀器與試劑


1.儀器紫外-可見分光光度計;量瓶、移液管、吸量管。

2.試劑亞硝酸鈉,硝酸鋁,氫氧化鈉,乙醇(均為分析純),5%亞硝酸鈉溶液,10%硝酸鋁溶液,1mol/L氫氧化鈉溶液,30%乙醇溶液,蘆丁對照品,蘆丁(原料藥)。


實驗內容與步驟


1.對照品溶液的制備精密稱取在120℃減壓干燥至恒重的蘆丁對照品100mg,置100mL量瓶中,加甲醇70mL,置水浴上微熱使溶解,放冷,加甲醇至刻度,搖勻。精密吸取10mL,置100mL量瓶中,加水至刻度,搖勻,即得(每1mL中含無水蘆丁0.1mg)。

2.標準曲線的制備精密量取對照品溶液(o.1mg/ml)o.0mL、1.0mL、2.0mL、3.0mL、4.0mL、5.0mL,分別置于10mL量瓶中,各加30%乙醇使成5.0mL,各精密加入5%亞硝酸鈉溶液0.3mL,充分搖勻,放置6分鐘。各精密加入10%硝酸鋁溶液0.3mL,充分搖勻,放置6分鐘。各加1lmol/L氫氧化鈉溶液4.0mL,用蒸餾水稀釋至刻度,充分搖勻,放置15分鐘,用分光光度計,在510nm波長處測定吸光度。以吸光度為縱坐標,濃度為橫坐標,繪制標準曲線。

3.試樣測定精密量取蘆丁試樣溶液(0.1mg/ml)3.0mL,置10mL量瓶中,按標準曲線制備項下自“各加30%乙醇使成5.0ml?!捌鹨婪ú僮髦敝翜y定出樣品的吸光度。


數據處理


1.根據測得的對照品的數據,繪制A—C標準曲線或計算回歸方程。

2.根據測得的試樣的數據,從標準曲線上讀出或由回歸方程計算出試樣溶液中蘆丁的重量(rag),按下式計算:

槐花科普知識

槐花:又名洋槐花,廣義的洋槐花指豆科植物的花及花蕾,一般將開放的花朵稱為“槐花”,也稱“槐蕊”,花蕾則稱為“槐米”。

1、常植于屋邊、路邊,中國各地普遍栽培,主要在北方,以黃土高原和華北平原為多,一般在每年4,5月開花,花期一般為10-15天左右。

2、洋槐花具有良好的觀賞價值,每到花期來臨時,一串串潔白的槐花綴滿樹枝,空氣中彌漫著淡淡的素雅的清香,沁人心脾。



擴展資料:

選地整地:

1、槐樹(洋槐)選擇向陽、肥沃、疏松、排水良好的壤土。深翻60厘米,整平耙細,作畦,畦寬70厘米,施足底肥,每畝用腐熟有機肥500千克或尿素5千克,圈肥3000-4000千克撒于畦面。

播種分株,可采用播種繁殖,也可用根蘗進行分株繁殖:

1、種子處理 選成熟、飽滿的種子先用70-80℃溫水浸種24小時,撈出摻2-3倍細沙,拌勻,堆放室內,催芽時注意經常翻倒調節(jié)上下溫度一致,以使發(fā)芽整齊,一般需7-10天,待種子裂口25%-30%時即可播種。

2、育苗 于春、秋季條播或穴播,條播法按播幅10-15厘米,覆土2-3厘米,播后鎮(zhèn)壓,每畝種量10-15千克;穴播法按穴距10-15厘米播種,每畝用種量4-5千克。

3、假植移栽 在北方,秋末落葉后,土壤凍結前起苗,假植越冬,挖假植溝,溝寬1-1.2米,深60-70厘米,翌春按株行距60厘米×40厘米栽植,栽后澆水。根蘗繁殖時,可挖取成齡樹的根蘗苗,按株行距1.8米×1.3米開穴,每穴1株,一般4-5年可成株。

參考資料:百度百科-槐花

如何用標準曲線法測定物質含量

以蘆丁為例,其他物質測定方式雷同


儀器與試劑


1.儀器紫外-可見分光光度計;量瓶、移液管、吸量管。

2.試劑亞硝酸鈉,硝酸鋁,氫氧化鈉,乙醇(均為分析純),5%亞硝酸鈉溶液,10%硝酸鋁溶液,1mol/L氫氧化鈉溶液,30%乙醇溶液,蘆丁對照品,蘆丁(原料藥)。


實驗內容與步驟


1.對照品溶液的制備精密稱取在120℃減壓干燥至恒重的蘆丁對照品100mg,置100mL量瓶中,加甲醇70mL,置水浴上微熱使溶解,放冷,加甲醇至刻度,搖勻。精密吸取10mL,置100mL量瓶中,加水至刻度,搖勻,即得(每1mL中含無水蘆丁0.1mg)。

2.標準曲線的制備精密量取對照品溶液(o.1mg/ml)o.0mL、1.0mL、2.0mL、3.0mL、4.0mL、5.0mL,分別置于10mL量瓶中,各加30%乙醇使成5.0mL,各精密加入5%亞硝酸鈉溶液0.3mL,充分搖勻,放置6分鐘。各精密加入10%硝酸鋁溶液0.3mL,充分搖勻,放置6分鐘。各加1lmol/L氫氧化鈉溶液4.0mL,用蒸餾水稀釋至刻度,充分搖勻,放置15分鐘,用分光光度計,在510nm波長處測定吸光度。以吸光度為縱坐標,濃度為橫坐標,繪制標準曲線。

3.試樣測定精密量取蘆丁試樣溶液(0.1mg/ml)3.0mL,置10mL量瓶中,按標準曲線制備項下自“各加30%乙醇使成5.0ml。“起依法操作直至測定出樣品的吸光度。


數據處理


1.根據測得的對照品的數據,繪制A—C標準曲線或計算回歸方程。

2.根據測得的試樣的數據,從標準曲線上讀出或由回歸方程計算出試樣溶液中蘆丁的重量(rag),按下式計算:

為什么要以蘆丁作為黃酮類測定的參比溶液

對照品溶液的制備精密稱定甘草苷、柚皮苷、蘆丁標準品適量,用甲醇溶解,分別定容于25,10,10 ml容量瓶中,制得濃度為0.075 04 g·L-1的甘草苷對照品溶液、0.968 g·L-1的柚皮苷對照品溶液和1.003 g·L-1的蘆丁對照品溶液。 2.2 樣品的提取取甘草粉末適量,精密稱定,加甲醇50 ml,稱重, (250 W,20 kHz)超聲提取80 min,稱重,補足損失重量,過濾,收集續(xù)濾液,即得。 2.3 測定方法 2.3.1 甘草苷為對照品的測定方法精確吸取提取液0.5 ml,加入1 ml甲醇,其中一份加入10%KOH溶液0.5 ml顯色,室溫放置5 min,用甲醇稀釋至10

以蘆丁標準品做標準曲線為什么要用亞硝酸鈉溶液,硝酸鋁溶液,氫氧化鈉溶液

這些構成顯色劑,按順序依次加入5%亞硝酸鈉溶液,10%硝酸鋁溶液,5%氫氧化鈉溶液可以使蘆丁顯色(橙紅色)。通常用于總黃酮的含量測定,其原理是:黃酮中的處于相鄰羰基、羥基可以共同絡合金屬而顯色。根據顯色之深淺(即吸光度A值之大小),判斷的總黃酮含量之高低。常用的顯色劑是亞硝酸鈉-硝酸鋁,檢測波長是508nm。步驟: 樣品液 0.5mL(具體的用量視樣品液的濃度而定)→加5%亞硝酸鈉溶液0.15mL 靜置6min→加10%硝酸鋁溶液0.15mL 靜置6min→加4%氫氧化鈉溶液2mL →加蒸餾水2.2mL(蒸餾水用于稀釋和調總體積,要使待測混合液的總體稱為5mL,2.2mL是暫定的)→待測混合液
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