兩種DNA鏈接酶來(lái)源和特點(diǎn)
- 教育綜合
- 2022-08-10 07:56:15
DNA連接酶的種類(lèi)及區(qū)別?限制酶和DNA連接酶作用的化學(xué)鍵分別是什么?載體的條件是?(3點(diǎn) )
1. (1)E·coli DNA連接酶,來(lái)源于大腸桿菌,可用于連接粘性末端; (2)T4DNA連接酶:來(lái)源于T4噬菌體,可用于連接粘性末端和平末端,但連接效率低. (3)熱穩(wěn)定的DNA連接酶(thermostableDNAligase),是從嗜熱高溫放線(xiàn)菌(Thermoactinomycesthermophilus)菌株中分離純化的,一種能夠在高溫下催化兩條寡核苷酸探針發(fā)生連接作用的一種核酸酶. 2. DNA連接酶:連接DNA單鏈與DNA單鏈之間的磷酸二酯鍵 限制性核酸內(nèi)切酶:剪切雙鏈DNA內(nèi)的磷酸二酯鍵 3. 作為運(yùn)載體必須具有三個(gè)條件: ①在宿主細(xì)胞中能保存下來(lái)并能大量復(fù)制; ②有多個(gè)限制如何理解DNA連接酶的作用特點(diǎn)
作用特點(diǎn):①不能連接兩條單鏈dna或環(huán)化dna,只能連接雙鏈dna分子的單鏈缺口。②只能連接失去一個(gè)磷酸二酯鍵形成的單鏈斷裂,不能連接缺失一個(gè)或多個(gè)氨基酸缺口③只作用于3端羥基和5端磷酸的鏈④連接反應(yīng)需要atp nad+和mg2+ 利用價(jià)值:可對(duì)缺口dna,平末端dna,黏性末端dna進(jìn)行連接。DNA連接酶主要包括( )和( )兩類(lèi)
您好,(1)E·coli DNA連接酶,來(lái)源于大腸桿菌,可用于連接粘性末端; (2)T4DNA連接酶:來(lái)源于T4噬菌體,可用于連接粘性末端和平末端,但連接效率低。 (3)熱穩(wěn)定的DNA連接酶(thermostableDNAligase),是從嗜熱高溫放線(xiàn)菌(Thermoactinomycesthermophilus)菌株中分離純化的,一種能夠在高溫下催化兩條寡核苷酸探針發(fā)生連接作用的一種核酸酶。高中生物 DNA聚合酶 DNA連接酶 作用區(qū)別
dna連接酶:主要是連接dna片段之間的磷酸二酯鍵,起連接作用,在基因工程中起作用。 dna聚合酶:主要是連接dna片段與單個(gè)脫氧核苷酸之間的磷酸二酯鍵,在dna復(fù)制中起做用。 dna聚合酶只能將單個(gè)核苷酸加到已有的核酸片段的3′末端的羥基上,形成磷酸二酯鍵;而dna連接酶是在兩個(gè)dna片段之間形成磷酸二酯鍵,不是在單個(gè)核苷酸與dna片段之間形成磷酸二酯鍵。 dna聚合酶是以一條dna鏈為模板,將單個(gè)核苷酸通過(guò)磷酸二酯鍵形成一條與模板鏈互補(bǔ)的dna鏈;而dna連接酶是將dn發(fā)叮篡顧詁該磋雙單晶a雙鏈上的兩個(gè)缺口同時(shí)連接起來(lái)。因此dna連接酶不需要模板。DNA連接酶有哪幾種
E·coliDNA連接酶,來(lái)源于大腸桿菌,可用于連接粘性末端;T4DNA連接酶,來(lái)源于T4噬菌體,可用于連接粘性末端和平末端,但連接效率低。展開(kāi)全文閱讀