細胞傳代需要用到胰酶,可以不加EDTA嗎
- 教育綜合
- 2022-07-16 07:56:16
用流式檢測細胞周期為什么用不含EDTA的胰酶消化
含不含EDTA無關緊要。只要能把細胞都分散成單細胞懸液,而后固定就可以了。收集細胞為什么必須是不含EDTA的胰酶
細胞用胰酶處理 細胞之間有粘性是由于細胞表面糖蛋白的糖鏈互相粘連的原因,胰蛋白酶處理后可分解細胞表面糖蛋白,細胞自然就分開了 還有就是 加分啊!樓上的膠原蛋白和細胞粘性沒關系吧,膠原蛋白性質穩(wěn)定在皮膚角質層的死細胞那含量較多吧細胞傳代過程,可以不可以不吸去胰酶呢,直接加入培養(yǎng)液傳代?
一般來說培育液都會終止胰酶消化,在實際操作以及能查閱的資料中都說明要移除胰酶后再加入培養(yǎng)液,清除胰酶是防止細胞消化過度影響傳代后細胞活性EDTA 在細胞培養(yǎng)中可以起到與胰酶相似的作用嗎?用血清可以終止它(EDTA)的作用嗎?
EDTA一般與胰酶聯(lián)合使用,不過我們實驗室沒有單獨用EDTA消化過。應該也可以的。細胞培養(yǎng)用胰蛋白酶溶液如何配制與消毒
博凌科為生物科技-為你解答:胰蛋白酶溶液的配制與消毒:胰蛋白酶的作用是使細胞間的蛋白質水解從而使細胞離散。不同的組織或者細胞對胰 酶的作用反應不一樣。胰酶分散細胞的活性還與其濃度、溫度和作用時間有關,在pH為8.0、溫度為37℃時,胰酶溶液的作用能力最強。使用胰酶時,應把握 好濃度、溫度和時間,以免消化過度造成細胞損傷。因Ca2+、 Mg2+和血清、蛋白質克降低胰酶的活性,所以配制胰酶溶液時應選用不含Ca2+、Mg2+的BSS,如:D-Hanks 液。終止消化時,可用含有血清培養(yǎng)液或者胰酶抑制劑終止胰酶對細胞的作用。1. 稱取胰蛋白酶:按胰蛋白酶液濃度為0.25%,用電子天平準確稱取粉劑溶入小展開全文閱讀