提取基因組是最后一步用無水乙醇洗滌之后,沒有倒掉無水乙醇會有影響嗎?

可以用異丙醇代替,兩者效果差不多,用異丙醇時(shí)體積為1/3~1/2,而用乙醇一般為2倍,但是異丙醇較難揮發(fā),通常先用異丙醇沉淀,然后再用乙醇洗滌.

無水乙醇與異丙醇使用無水乙醇與異丙醇會在哪些情況

無水乙醇與異丙醇使用無水乙醇與異丙醇會在哪些情況 氯仿: RNA脫離DNA及蛋白，從混合液中層析到水相.水相中的RNA可用異丙醇沉淀濃縮. 接著用異丙醇進(jìn)行二次沉淀，隨后用乙醇洗滌沉淀，可去除所有殘留的蛋白質(zhì)和無機(jī)鹽. RNA樣品中如果含有無機(jī)鹽, 有可能對后續(xù)實(shí)驗(yàn)操作中的一些酶促反應(yīng)產(chǎn)生抑制作用。實(shí)際操作過程中用到的體積不一樣，異丙醇一般用0.6-1倍體積，無水乙醇一般用2倍體積。沉淀效果是一樣的，如果要提高靈敏度，可以考慮加一些磁珠

在DNA的沉淀實(shí)驗(yàn)中，為什么要把乙醇預(yù)冷

核酸酶在體外適宜的條件也可以降解DNA，因此提核酸要在低溫下進(jìn)行，盡量減少DNA的降解。所以要將乙醇預(yù)冷。

用無水乙醇沉淀DNA原因

用無水乙醇沉淀DNA，這是實(shí)驗(yàn)中最常用的沉淀DNA的方法。乙醇的優(yōu)點(diǎn)是可以任意比和水相混溶， 乙醇與核酸不會起任何化學(xué)反應(yīng)，對DNA很安全，因此是理想的沉淀劑。

DNA溶液是DNA以水合狀態(tài)穩(wěn)定存在，當(dāng)加入乙醇時(shí)，乙醇會奪去DNA周圍的水分子，使DNA失水而易于聚合。一般實(shí)驗(yàn)中，是加2倍體積的無水乙醇與DNA相混合，其乙醇的最終含量占67％左右。

因而也可改用95％乙醇來替代無水乙醇（因?yàn)闊o水乙醇的價(jià)格遠(yuǎn)遠(yuǎn)比95％乙醇昂貴）。

但是加95％的乙醇使總體積增大，而DNA在溶液中有一定程度的溶解，因而DNA損失也增大，尤其用多次乙醇沉淀時(shí)，就會影響收得率。折中的做法是初次沉淀DNA時(shí)可用95％乙醇代替無水乙酵，最后的沉淀步驟要使用無水乙醇。也可以用0.6倍體積的異丙醇選擇性沉淀DNA。一般在室溫下放置15－30分鐘即可。

沉淀DNA時(shí)為什么要用無水乙醇

乙醇的優(yōu)點(diǎn)是可以任意比和水相混溶,乙醇與核酸不會起任何化學(xué)反應(yīng),對DNA很安全,因此是理想的沉淀劑。 DNA 溶液是DNA以水合狀態(tài)穩(wěn)定存在，當(dāng)加入乙醇時(shí),乙醇會奪DNA周圍的水分子，使DNA失水而易于聚合。一般實(shí)驗(yàn)中,是加2倍體積的無水乙醇與DNA相混 合,其乙醇的最終含量占67%左右。因而也可改用95%乙醇來替代懈水乙醇(因?yàn)闊o水乙醇的價(jià)格遠(yuǎn)遠(yuǎn)比95%乙醇昂貴)。但是加95%的乙醇使總體積增 大,而DNA在溶液中有一定程度的溶解,因而DNA損失也增大,尤其用多次乙醇沉淀時(shí),就會影響收得率。折中的做法初次沉淀DNA時(shí)可用95%乙醇代替無水乙醇,最后的沉淀步驟要使用無水乙醇。也可以用0.6倍體

為什么異氰酸酯和水的反應(yīng)在聚氨酯生產(chǎn)中比較重要

異氰酸酯和水的反應(yīng)是聚氨酯泡沫塑料發(fā)泡過程中一個(gè)重要的反應(yīng),其反應(yīng)產(chǎn)物聚脲可以在發(fā)泡早期提高泡孔壁的強(qiáng)度,為氣泡的穩(wěn)定提供有利的條件,而產(chǎn)物二氧化碳則是泡沫發(fā)起過程中重要的氣體來源。同時(shí),在異氰酸酯類膠黏劑、濕固化聚氨酯涂料等工業(yè)產(chǎn)品的應(yīng)用中,異氰酸酯和水的反應(yīng)亦非常重要。本文以高效液相色譜法為主要檢測手段,結(jié)合核磁氫譜、電噴霧質(zhì)譜等分析方法,對三種甲苯異氰酸酯、兩種甲苯二異氰酸酯和水的反應(yīng)分別進(jìn)行了研究,探討了異氰酸酯和水的反應(yīng)過程及反應(yīng)動(dòng)力學(xué)。高效液相色譜法對反應(yīng)體系的分析結(jié)果顯示,不論單異氰酸酯還是二元異氰酸酯和水的反應(yīng),體系中均存在較高濃度的中間產(chǎn)物胺,且胺的濃度隨著反應(yīng)的進(jìn)行呈現(xiàn)先增