交叉反應(yīng)實(shí)驗(yàn)怎么做
- 教育綜合
- 2023-07-03 17:44:22
免疫共沉淀
免疫共沉淀原理及步驟 免疫沉淀(Immunoprecipitation, IP)原理 IP是利用抗原蛋白質(zhì)和抗體的特異性結(jié)合以及細(xì)菌蛋白質(zhì)的“protein A/G"特異性地結(jié)合到抗體(免疫球蛋白)的FC片段的現(xiàn)象開發(fā)出來的方法。目前多用protein A/G預(yù)先結(jié)合在argarose beads上,使之與含有抗原的溶液及抗體反應(yīng)后,beads上的prorein A/G就能達(dá)到吸附抗原的目的。通過低速離心,可以從含有目的抗原的溶液中將目的抗原與其它抗原分離。 免疫沉淀實(shí)驗(yàn)的操作步驟比較多,同時由于在非變性條件下進(jìn)行實(shí)驗(yàn),所以要得到一個完美的實(shí)驗(yàn)結(jié)果,不僅需要高質(zhì)量的抗體,同時對免疫沉淀體系也需請教檢測食物含抗生素的簡單方法(我是老師想做這方面實(shí)驗(yàn))
牛奶中抗生素殘留的幾種常用檢測方法 隨著奶牛飼養(yǎng)業(yè)的發(fā)展,抗生素在預(yù)防和治療奶牛疾病方面得到廣泛的應(yīng)用。生鮮牛奶中抗生素的來源主要是:第一,治療泌乳期病牛時使用的抗生素會從奶牛體內(nèi)移行到乳腺殘留進(jìn)入牛奶中,資料表明治療后的奶牛,其擠出的牛奶5天內(nèi)都有抗生素殘留;其二,為了預(yù)防奶牛疾病并提高產(chǎn)量,在奶牛飼料中添加抗生素也會造成牛奶中抗生素的殘留;第三,由于牧場管理不善,擠奶、儲奶沒有嚴(yán)格的衛(wèi)生制度和配套的設(shè)施,人為添加或造成牛奶抗生素的污染。 牛奶中含有抗生素,不僅對人的健康造成很大的危害,而且對乳品加工企業(yè)帶來經(jīng)濟(jì)損失(因無法生成酸奶和奶酪)。因此必須嚴(yán)格控制牛奶中抗生素殘留,除了要做好科學(xué)飼如何選擇抗體
抗體的選擇
作為western來講,理論上單抗比多抗的特異性要好,但單抗種類較少一般價(jià)格偏高,所以一般來說多抗足夠了。用于western的抗體和用于ELISA的抗體,一 般來說用于western的抗體識別的是氨基酸序列特異性;而可用于ELISA的抗體則要看抗原種類,有些是識別氨基酸序列特異性,有些是識別構(gòu)像特異性。所以一-般根據(jù)抗體說明書來確定。
做免疫印跡時選擇抗體主要應(yīng)考慮兩個問題,一是所選抗體是否能識別凝膠電泳后轉(zhuǎn)印至膜上的變性蛋白,另一個是所選抗體是否會引起交叉反應(yīng)條帶。
覺得單抗和多抗價(jià)格上差異與其處理方式有很大關(guān)系,可以仔細(xì)咨詢一下銷售 商。
如何檢測補(bǔ)體的存在
補(bǔ)體測定 第一節(jié) 補(bǔ)體的性質(zhì)與活化途徑 一、補(bǔ)體的性質(zhì) 補(bǔ)體(complement,C):是一組存在于人和脊椎動物(vertebrates)血清及組織液中具有酶樣活性、不耐熱和功能上連續(xù)反應(yīng)的糖蛋白,是抗體發(fā)揮溶細(xì)胞作用的必要補(bǔ)充條件,故稱為補(bǔ)體。 補(bǔ)體系統(tǒng)的功能: 廣泛參與機(jī)體的抗感染防御反應(yīng), 介導(dǎo)細(xì)胞溶解, 調(diào)理吞噬, 免疫黏附, 參與炎癥反應(yīng)引起機(jī)體免疫損傷等 補(bǔ)體按其性質(zhì)與功能分為三類,即 ? ①補(bǔ)體系統(tǒng)的固有成分,共9種,按先后次序分別命名為C1-C9 ②調(diào)節(jié)和控制補(bǔ)體系統(tǒng)活化的成分,多以其功能命名,如C1抑制物 ③補(bǔ)體受體(CR),以其結(jié)合對象來命名 二、補(bǔ)體的活化途徑 經(jīng)典途徑展開全文閱讀
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