采用凱氏定氮裝置測(cè)定蛋白質(zhì)含量時(shí),影響測(cè)定結(jié)果的因素有哪些
- 教育綜合
- 2022-08-27 07:56:27
凱氏定氮法影響蛋白質(zhì)測(cè)定結(jié)果準(zhǔn)確性的因素有哪些
1、樣品消化的完全程度。如:被濃硫酸脫水的樣品(有機(jī)物),炭化成的氮,由于消化不完全就不能被二氧化硫完全還原成氨,就會(huì)造成測(cè)定結(jié)果偏低。 2、消化溫度。消化食不能用強(qiáng)火,應(yīng)保持緩和沸騰,以免粘附在凱氏瓶?jī)?nèi)壁上的含氮化合物在無(wú)硫酸存在的情況下未消化完全而造成氮損失。 3、蒸餾裝置的氣密性。若氣密性差(漏氣),蒸餾出來(lái)的氨氣就會(huì)揮發(fā)流失。(所以,漏斗加堿后應(yīng)立刻水封,以免氨氣由此處逸出而造成損失。) 4、吸收液的溫度。硼酸吸收液的溫度不應(yīng)超過(guò)40℃,否則對(duì)氨的吸收作用減弱,而造成氨損失。凱氏定氮法測(cè)蛋白質(zhì)含量的誤差來(lái)源
1.蛋白質(zhì)附在壁上,被檢樣消化不完全,使氮有損失。 2. 硫酸缺少,這樣會(huì)形成硫酸氫鉀,而不與氨作用 3.氨是否完全蒸餾出來(lái) 4.有時(shí)銅離子與氨作用,生成深蘭色的結(jié)合物[Cu(NH3)4]2+影響蛋白質(zhì)的等電點(diǎn)測(cè)定實(shí)驗(yàn)結(jié)果準(zhǔn)確性的因素有哪些
1、樣品消化的完全程度。如:被濃硫酸脫水的樣品(有機(jī)物),炭化成的氮,由于消化不完全就不能被二氧化硫完全還原成氨,就會(huì)造成測(cè)定結(jié)果偏低。 2、消化溫度。消化食不能用強(qiáng)火,應(yīng)保持緩和沸騰,以免粘附在凱氏瓶?jī)?nèi)壁上的含氮化合物在無(wú)硫酸存在的情況下未消化完全而造成氮損失。 3、蒸餾裝置的氣密性。若氣密性差(漏氣),蒸餾出來(lái)的氨氣就會(huì)揮發(fā)流失。(所以,漏斗加堿后應(yīng)立刻水封,以免氨氣由此處逸出而造成損失。) 4、吸收液的溫度。硼酸吸收液的溫度不應(yīng)超過(guò)40℃,否則對(duì)氨的吸收作用減弱,而造成氨損失。用微量凱氏定氮法測(cè)定一樣品的蛋白質(zhì)含量時(shí),測(cè)定結(jié)果比實(shí)際值偏低,試分析可能的原因?
蒸餾時(shí),裝置密封不好,有氨溢出,吸收不全.凱氏定氮法測(cè)食品的蛋白質(zhì),如何避免非蛋白氮影響測(cè)定結(jié)果?
針對(duì)你這個(gè)問題,我覺得你應(yīng)該是要測(cè)真蛋白的含量。測(cè)定方法如下 一、測(cè)定原理 硫酸銅在堿性溶液中,可將蛋白質(zhì)沉淀,且不溶于熱水,過(guò)濾和洗滌后,可將純蛋白質(zhì)和非蛋白質(zhì)含氮物分離,再用凱氏定氮法測(cè)定沉淀中的蛋白質(zhì)含量。 二、儀器設(shè)備 (1)燒杯:200mL。 (2)定性濾紙。 (3)其它設(shè)備與粗蛋白質(zhì)測(cè)定性相同。 三、試劑及配制 (1) 100g/L硫酸銅溶液:分析純硫酸銅(CuSO4 5H2O)10g溶于100mL水中。 (2) 25g/L氫氧化鈉溶液:將2.5g分析純氫氧化鈉溶于100mL水中。 (3) 10g/L氯化鋇溶液:1g氯化鋇(BaCl2 H2O)溶于100mL水中。 (4) 2mol展開全文閱讀