酶切反應以后可不可以第二天再做電泳, 如果可以的話怎么保存,-20度么?
- 教育綜合
- 2024-11-02 13:00:04
急:酶切反應以后可不可以第二天再做電泳,謝謝
加loading buffer或是加熱終止反應,第二天用的話,4度保存即可,今天剛做過PCR加好樣后不馬上跑,應放在多少度?4℃,還是-20℃更好些?
如果在短時間(一天)之內(nèi)要跑電泳的話建議4度保存,如果要幾天或是更長時間的話建議-20度保存,當然如果一定要放4度也沒關系,我以前有一個樣品在4度放了2個月,也沒有明顯變化。可不可以第二天再做電泳,如果可以的話怎么
看你是什么工件,如果放到第二天工件還沒有生銹或者氧化,就可以第二天再做,不過不建議酶切完載體不實用回收純化試劑盒,可以跑電泳圖不
酶切完載體不實用回收純化試劑盒,可以跑電泳圖,因為這個時候的沒切完載體,不使用回收,以后在試劑盒里面是可以二次利用的,因為酶的活性并沒有完全的喪失,所以說可以跑電泳圖做基因多態(tài)性,PCR產(chǎn)物必須純化后才能酶切嗎
博凌科為-為你解答:如果你不純化,直接做酶切不是不行,而是PCR產(chǎn)物里面緩沖液并不是合適的酶切緩沖液,會極大的影響酶切的效率。甚至于根本就切不開,即便你隔夜酶切。 你可以自己檢查一下那些用來做酶切的緩沖液(A,B,C,D,E,H,Multi-Core)之間成分的差別,和酶在各個不同緩沖液的效率的差別,你就知道緩沖液用不合適會對酶切效率有多大的影響。與其浪費內(nèi)切酶和時間,何必呢,你還不如純化后酶切,只不過多了個步驟而已。至于PCR產(chǎn)物的保存,沒有什么特殊要求,反應結束后你可以直接凍在-20。也可以跑電泳后切下你的目的條帶放在四度,如果是純化了保存,如果你不反復凍融的話,放幾年沒有問題。DNA是很展開全文閱讀
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