實(shí)驗(yàn)室有一把20-200ul的加樣器,現(xiàn)在需要準(zhǔn)確量取50ul的樣品,應(yīng)該怎樣操作
- 教育綜合
- 2023-09-07 07:57:26
如何用微量移液器量取50ul的蒸餾水
定量移液器的校準(zhǔn)——稱量法 校準(zhǔn)應(yīng)在無(wú)通風(fēng)的房間,移液器和空氣溫度在20℃-25℃之間,相對(duì)濕度必需在55%以上。特別是當(dāng)移液量在50ul以下其空氣濕度應(yīng)越高越好以減少蒸發(fā)損失的影響。 在萬(wàn)分之一級(jí)別天平上放置一個(gè)小三角燒瓶,用待標(biāo)定的移液器吸取蒸餾水(隔夜存放)加入小三角燒瓶?jī)?nèi)底部,每次稱重后計(jì)量,去皮重后再加蒸餾水,連續(xù)加蒸餾水 10次。加蒸餾水的量根據(jù)待標(biāo)定的移液器不同規(guī)格而不同,見下表。移液器10次標(biāo)定稱量在所要求的重量范圍之內(nèi)為合格移液器;不合格移液器需要進(jìn)行調(diào)整。移液器標(biāo)定合格后,填寫自校記錄。 移液器規(guī)格 標(biāo)定使用蒸餾水量 要求重量范圍 0.5-10ul 2ul 1.75-2.2如何用微量移液器量取50微升的蒸餾水
實(shí)驗(yàn)步驟 1、輕輕轉(zhuǎn)動(dòng)微量移液器的調(diào)節(jié)輪,使讀數(shù)顯示為所要取液體的體積。 2、把白套筒頂端插入吸頭,在輕輕用力下壓的同時(shí),把手中的移液器按逆時(shí)針?lè)较蛐D(zhuǎn)一下。 (切記力不能過(guò)猛,更不能采取剁吸頭的方法來(lái)進(jìn)行安裝,因?yàn)槟菢幼鰰?huì)對(duì)您手中的移液器 造成不必要的損傷。 P1000 使用藍(lán)色微量移液器頭, P200 及 P20 使用黃色微量移液器頭。 ) 3、輕輕按下推動(dòng)按鈕,推到第一檔。 4、手握移液器,將吸液尖垂直浸入蒸餾水中,浸入深度為 2~4mm。 5、經(jīng) 2~3s 后緩慢松開推動(dòng)按鈕,即從第一擋還原。 第一次我們用量程為 P1000 的微量吸移器分別量取 1000?L,500?L., 200?移液器的使用方法
移液器的使用方法有:選擇合適的移液器、設(shè)定移液體積、裝配吸頭、移液、移液器的放置,具體如下:
1、選擇合適的移液器
移取標(biāo)準(zhǔn)溶液(如水、緩沖液、稀釋的鹽溶液和酸堿溶液)時(shí)多使用空氣置換移液器,移取具有高揮發(fā)性、高黏稠度以及密度大于2.0g/cm的液體或者在臨床聚合酶鏈反應(yīng)(PCR)測(cè)定中的加樣時(shí)使用正向置換移液器。
2、設(shè)定移液體積
調(diào)節(jié)移液器的移液體積控制旋鈕進(jìn)行移液量的設(shè)定。調(diào)節(jié)移液量時(shí),應(yīng)視體積大小而旋轉(zhuǎn)刻度至超過(guò)設(shè)定體積的刻度,再回調(diào)至設(shè)定體積,以保證移取的最佳精確度。
3、裝配吸頭
使用單通道移液器時(shí),將可調(diào)式移液器的嘴錐對(duì)準(zhǔn)吸頭管口,輕輕用力垂直下壓使之裝緊。使用多通道移液器時(shí),將移液器的第一排對(duì)準(zhǔn)第一個(gè)管嘴,傾斜插入,前后稍微搖動(dòng)擰緊。
4、移液
保證移液器、吸頭和待移取液體處于同一溫度;然后用待移取吸液體潤(rùn)洗吸頭1-2次,尤其是黏稠的液體或密度與水不同的液體。移取液體時(shí),將吸頭尖端垂直浸入液面以下2-3mm深度緩慢均勻地松開操作桿,待吸頭吸入溶液后靜置2-3秒,并斜貼在容器壁上淌走吸頭外壁多余的液體。
5、 移液器的放置
使用移液器完畢后,用大拇指按住吸頭推桿向下壓,安全退出吸頭后將其容量調(diào)到標(biāo)識(shí)的最大值,然后將移液器懸掛在專用的移液器架上;長(zhǎng)期不用時(shí)應(yīng)置于專用盒內(nèi)。
臨床常用的微量移液器的設(shè)計(jì)依據(jù)是胡克定律:即在一定限度內(nèi)彈簧伸展的長(zhǎng)力與彈力成正比,也就是移液器內(nèi)的液體體積與移液器內(nèi)的彈簧彈力成正比。微量移液器加樣的物理學(xué)原理有兩種:使用空氣墊加樣和使用無(wú)空氣墊的活塞正移動(dòng)加樣。
擴(kuò)展資料:
注意事項(xiàng)
在調(diào)節(jié)移液器的過(guò)程中轉(zhuǎn)動(dòng)旋鈕不可太快,也不能超出其最大或最小量程,否則易導(dǎo)致量不準(zhǔn)確,并且易卡住內(nèi)部機(jī)械裝置而損壞移液器。在裝配吸頭的過(guò)程中用移液器反復(fù)強(qiáng)烈撞擊吸頭反而會(huì)擰不緊,長(zhǎng)期如此操作會(huì)導(dǎo)致移液器中零件松散,嚴(yán)重時(shí)會(huì)導(dǎo)致調(diào)節(jié)刻度的旋鈕卡住。
當(dāng)移液器吸頭里有液體時(shí),切勿將移液器水平放置或倒置,以免液體倒流而腐蝕活塞彈簧。對(duì)移液器進(jìn)行高溫消毒時(shí),應(yīng)首先查閱所使用的移液器是否適合高溫消毒后在進(jìn)行處理。
參考資料來(lái)源:百度百科-移液器