DNA聚合酶里面是否含有那種成分導(dǎo)致二苯胺顯色
- 教育綜合
- 2023-06-19 12:59:35
二苯胺和DNA的顯色反應(yīng)為什么要加熱?
是因?yàn)镈NA在酸性條件下加熱,其嘌呤堿與脫氧核糖間的糖苷鍵斷裂,生成嘌呤堿、脫氧核糖和脫氧嘧啶核苷酸,而2-脫氧核糖在酸性環(huán)境中加熱脫水生成ω-羥基-γ-酮基戊醛,后者與二苯胺試劑反應(yīng)生成藍(lán)色物質(zhì)。 所以說,加熱是為了讓DNA分解,然后才能與二苯胺反應(yīng)請(qǐng)?jiān)敿?xì)解釋一下DNA與RNA
RNA與DNA最重要的區(qū)別一是RNA只有一條鏈,二是它的堿基組成與DNA的不同,RNA沒有堿基T(胸腺嘧啶),而有堿基U(尿嘧啶)。所以導(dǎo)致他們有以下性質(zhì)上的不同。 1.兩性解離:DNA無,只有酸解離,堿基被屏蔽(在分子內(nèi)部形成了H鍵)。RNA有,有PI。 2.粘度大:DNA;RNA,粘度由分子長度/直徑?jīng)Q定,DNA為線狀分子,RNA為線團(tuán)。 3.堿的作用:DNA耐堿RNA易被堿水解。 4.顯色反應(yīng): 鑒別DNA和RNA+濃HCl RNA ------→ 綠色化合物 DNA ------→ 藍(lán)紫色化合物苔黑酚 二苯胺啡啶溴紅(熒光染料)和溴嘧啶都可對(duì)DNA染色,原理是卡在分子中,DNA的離心和生物問題—PCR
PCR的全稱是:多聚酶鏈反應(yīng),用俗話說就是人為地制造一個(gè)環(huán)境,使雙鏈基因片段進(jìn)行復(fù)制、擴(kuò)增 目的基因:就是你想要擴(kuò)增的基因片段 變性:是在熱的環(huán)境下使雙鏈解鏈,一般需要94攝氏度 引物:引導(dǎo)復(fù)制的開始,是一種RNA單鏈片段,能引導(dǎo)復(fù)制的起始位置 聚合酶:用的是Taq酶是在火山口找到的一種耐熱的酶,在它的作用下以四種脫氧核苷酸(dNTP)為原料合成雙鏈 延伸:通俗點(diǎn)說就是原來的模板鏈和新合成的單鏈組成一條新的雙鏈的過程,延伸時(shí)間的長短、溫度的高低會(huì)影響新雙鏈的質(zhì)量 PCR的大致過程 1、模板DNA 2、(第一輪循環(huán)):模板DNA變性和引物復(fù)性 3、(第一輪循環(huán)):引物延伸 4、(第二輪循環(huán)):新DNA合成酶的成分
其實(shí)就是DNA聚合酶,參加的最主要反應(yīng)是DNA的復(fù)制 DNA聚合酶(EC編號(hào)2.7.7.7)是一種參與DNA復(fù)制的酶。它主要是以模板的形式,催化去氧核糖核苷酸的聚合。聚合后的分子將會(huì)組成模板鏈并再進(jìn)一步參與配對(duì)。 DNA聚合酶以去氧核苷酸三磷酸(dATP、dCTP、dGTP、或dTTP,四者統(tǒng)稱dNTPs)為底物,沿模板的3'→5'方向,將對(duì)應(yīng)的去氧核苷酸連接到新生DNA鏈的3'端,使新生鏈沿5'→3'方向延長。新鏈與原有的模板鏈序列互補(bǔ),亦與模板鏈的原配對(duì)鏈序列一致。 已知的所有DNA聚合酶均以5'→3'方向合成DNA,且均不能「重新」(de nov')合成DNA,而只能將去氧核苷酸加到已有為什么DNA里是胸腺嘧啶而RNA里是尿嘧啶?
U和T在結(jié)構(gòu)上就很相似,只不過T多了一個(gè)甲基,RNA在進(jìn)化上很可能是先于DNA出現(xiàn),自然界選擇DNA代替RNA作為遺傳物質(zhì)的載體一個(gè)原因就是DNA更穩(wěn)定,T其實(shí)可以看成U的甲基化修飾,聯(lián)想到現(xiàn)在已知的甲基化修飾所起的保護(hù)作用,可能當(dāng)初DNA就是因?yàn)閁被甲基化修飾成了T而不易被某些酶降解因此更穩(wěn)定。展開全文閱讀
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