什么是骨髓瘤細(xì)胞8-ag培養(yǎng)基

8－AG（即8－氮鳥嘌呤）是一種堿性細(xì)胞殺傷因子。細(xì)胞DNA的合成主要是兩個途徑，一個是主要途徑，一個是補(bǔ)救途徑，而HGPRT酶（即次黃嘌呤－鳥嘌呤核糖轉(zhuǎn)移酶）是補(bǔ)救途徑嘌呤的主要合成酶，正常情況下，細(xì)胞可以同時通過這兩種途徑來合成DNA。而8－AG也是一種嘌呤，自然也可以被認(rèn)為是一種合成DNA的原料，但由于它是有毒的，它的存在會殺死細(xì)胞。而HGPRT酶缺陷的骨髓瘤細(xì)胞不能通過補(bǔ)救途徑合成DNA，所以就可以存活。因而經(jīng)8－AG篩選后的sp2/0細(xì)胞都是HGPRT酶缺陷株。

單克隆抗體制備的基本原理與過程？有什么意義

原理： B淋巴細(xì)胞在抗原的刺激下，能夠分化、增殖形成具有針對這種抗原分泌特異性抗體的能力。B細(xì)胞的這種能力和量是有限的，不可能持續(xù)分化增殖下去，因此產(chǎn)生免疫球蛋白的能力也是極其微小的。將這種B細(xì)胞與非分泌型的骨髓瘤細(xì)胞融合形成雜交瘤細(xì)胞，再進(jìn)一步克隆化，這種克隆化的雜交瘤細(xì)胞是既具有瘤的無限生長的能力，又具有產(chǎn)生特異性抗體的B淋巴細(xì)胞的能力，將這種克隆化的雜交瘤細(xì)胞進(jìn)行培養(yǎng)或注入小鼠體內(nèi)即可獲得大量的高效價、單一的特異性抗體。這種技術(shù)即稱為單克隆抗體技術(shù)。 過程 1）免疫脾細(xì)胞的制備 制備單克隆抗體的動物多采用純系 Balb/c小鼠。免疫的方法取決于所用抗原的性質(zhì)。免疫方法同一般血清的制備，也

人體內(nèi)最主要的抗體是？

抗體 科技名詞定義 中文名稱：抗體 英文名稱：antibody;Ab 定義1：能與相應(yīng)抗原(表位)特異性結(jié)合的具有免疫功能的球蛋白。 應(yīng)用學(xué)科：免疫學(xué)（一級學(xué)科）；免疫系統(tǒng)（二級學(xué)科）；免疫分子（三級學(xué)科） 定義2：在人和動物體內(nèi)，由于抗原或半抗原入侵刺激機(jī)體而在細(xì)胞中產(chǎn)生的免疫球蛋白。能可逆、非共價、特異地與相應(yīng)抗原結(jié)合，形成抗原-抗體復(fù)合體。 應(yīng)用學(xué)科：生物化學(xué)與分子生物學(xué)（一級學(xué)科）；總論（二級學(xué)科） 定義3：機(jī)體內(nèi)B細(xì)胞在抗原刺激下所產(chǎn)生的具特異性免疫功能的球蛋白。 應(yīng)用學(xué)科：水產(chǎn)學(xué)（一級學(xué)科）；水產(chǎn)生物病害及防治（二級學(xué)科） 定義4：具有抗原結(jié)合部位，能與抗原分子上相應(yīng)表位發(fā)生特異性

單克隆抗體的制備過程

過程 1）免疫脾細(xì)胞的制備 制備單克隆抗體的動物多采用純系 Balb/c小鼠。免疫的方法取決于所用抗原的性質(zhì)。免疫方法同一般血清的制備，也可采用脾內(nèi)直接免疫法。 2）骨髓瘤細(xì)胞的培養(yǎng)與篩選 在融合前，骨髓瘤細(xì)胞應(yīng)經(jīng)過含8-AG的培養(yǎng)基篩選，防止細(xì)胞發(fā)生突變恢復(fù)HGPRT的活性（恢復(fù)HGPRT的活性的細(xì)胞不能在含8-AG的培養(yǎng)基中存活）。骨髓瘤細(xì)胞用10%小牛血清的培養(yǎng)液在細(xì)胞培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)，融合前24h換液一次，使骨髓瘤細(xì)胞處于對數(shù)生長期。 3）細(xì)胞融合的關(guān)鍵: 1技術(shù)上的誤差常常導(dǎo)致融合的失敗。例如，供者淋巴細(xì)胞沒有查到免疫應(yīng)答。這必然要失敗的。 2融合試驗(yàn)最大的失敗原因是污染，融合成功的關(guān)鍵

關(guān)于T細(xì)胞和瘤細(xì)胞的問題

任何一種病原微生物都具有多種抗原決定簇，因 此，在機(jī)體內(nèi)誘發(fā)出來的抗體也必然是多種抗體的混 合物，稱為多克隆抗體, 這種抗體制劑在醫(yī)療中常常 發(fā)生非特異性交叉反應(yīng)而出現(xiàn)假陽性結(jié)果。 根據(jù)Burnet的“克隆選擇”學(xué)說，每個淋巴B細(xì)胞 克隆只能產(chǎn)生一種能識別特異性抗原決定簇的抗體， 這就是單克隆抗體 (monoclonal antibody, McAb)。 單克隆抗體是將抗體產(chǎn)生細(xì)胞與具有無限 增殖能力的骨髓瘤細(xì)胞相融合，通過有限稀釋 法及克隆化使雜交瘤細(xì)胞成為純一的單克隆細(xì) 胞系而產(chǎn)生的。 制備特定抗原的單克隆抗體，首先要制備用于免 疫的適當(dāng)抗原，再用抗原進(jìn)行動物免疫。 有的抗原可以用化學(xué)合成