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微生物遺傳育種中常見突變株篩選方法,如何應(yīng)用

比較微生物,動植物基因突變的篩選與鑒定方法主要區(qū)別是什么

1.功能互補法:使突變株表達(dá),與空白相對比 2.核酸雜交法:使用突變株基因單鏈與原基因雜交,能完全配就未能成功 3.定位克隆 4.差別雜交分離目地基因

怎樣篩選營養(yǎng)缺陷型菌株

在篩選營養(yǎng)缺陷型突變株的工作中,常用三種培養(yǎng)基:

一是基本培養(yǎng)基,它是僅能滿足微生物野生型菌株生長要求的培養(yǎng)基。第二種是完全培養(yǎng)基,它是能滿足某微生物所有營養(yǎng)缺陷型菌株營養(yǎng)要求的天然或半合成培養(yǎng)基。第三種是補充培養(yǎng)基,凡是只能滿足某種營養(yǎng)缺陷型生長需要的合成培養(yǎng)基,就稱為補充培養(yǎng)基。

1、用于誘發(fā)營養(yǎng)缺陷型的誘變劑有亞硝基胍,紫外線,亞硝酸等,其中亞硝基胍的誘發(fā)突變率極高,一般可達(dá)10%以上,另外,隨著誘變劑量的提高突變頻率也增加。

2、在誘變之后存活的菌體中,存活的營養(yǎng)缺陷型菌株的數(shù)量很少,而野生型細(xì)胞卻大量存在,所以常采用抗生素法和菌絲過濾法來篩選營養(yǎng)缺陷型菌株。

3、經(jīng)過第二步,野生型的細(xì)胞和營養(yǎng)缺陷型細(xì)胞數(shù)量比例發(fā)生很大變化,但是終究還是混合體,要設(shè)法把缺陷型菌株從群體分離檢出,可用點植對照法,影印法,夾層法,限量補充培養(yǎng)法來分離。

4、缺陷型菌株的鑒定,實際是測定營養(yǎng)缺陷型菌株所需的生長因子種類。鑒定的方法可分為兩大類:一種方法是在一個平皿中加入一種營養(yǎng)物質(zhì)以測定多株缺陷型菌株(10-50)對該生長因子的需求情況。

第二種方法是在同一個平皿上測定一種缺陷型菌株對許多生長因子的需求情況,成為生長譜法。

擴展資料:

營養(yǎng)缺陷型菌株廣泛應(yīng)用于核苷酸及氨基酸等產(chǎn)品的生產(chǎn)。

1、阻斷代謝途徑,積累中間代謝產(chǎn)物。

2、阻斷分支代謝,改變代謝方向,積累另一終端代謝產(chǎn)物。

3、解除反饋抑制,積累代謝產(chǎn)物。

4、利用滲漏缺陷型進(jìn)行代謝調(diào)控育種。

參考資料來源:百度百科-營養(yǎng)缺陷型菌株

論述從環(huán)境中篩選目標(biāo)菌中的方法,一種就可以,詳細(xì)點

5.6 菌種篩選方法 所有的微生物育種工作都離不開菌種篩選。尤其是在誘變育種工作中,篩選是最為艱難的也是最為重要的步驟。經(jīng)誘變處理后,突變細(xì)胞只占存活細(xì)胞的百分之幾,而能使生產(chǎn)狀況提高的細(xì)胞又只是突變細(xì)胞中的少數(shù)。要在大量的細(xì)胞中尋找真正需要的細(xì)胞,就象是大海撈針,工作量很大。簡潔而有效的篩選方法無疑是育種工作成功的關(guān)鍵。 為了花費最少的工作量,在最短的時間內(nèi)取得最大的篩選成效,就要求采用效率較高的科學(xué)篩選方案和手段。因為誘變育種中的篩選工作最復(fù)雜,所以,本節(jié)主要討論誘變育種的篩選方法,這些方法也為其它育種方法的篩選提供了借鑒。 5.6.1菌種篩選方案 在實際工作中,為了提高篩選效率,往往將篩

如果得到了一株突變菌株,如何進(jìn)行基因鑒定,有哪些方法?

要具體看你是怎樣得到突變菌株的了。 如果是采用化學(xué)或物理誘變育種,得到的,則有可能是點突變。只能通過SNP、AFLP等方法找突變位點了。當(dāng)然也可以通過蛋白質(zhì)組技術(shù)找蛋白質(zhì)的差異 如果是采用轉(zhuǎn)座子誘變的方法,則可以直接克隆轉(zhuǎn)座子插入的側(cè)翼序列,通過測序而直接知道突變的基因位點。 個人看法,供參考。

微生物判斷:要獲得一抗藥性突變株,可用相應(yīng)的藥物對出發(fā)菌株進(jìn)行誘變處理?

說法不確切。 應(yīng)該說說用相應(yīng)的藥物對誘變的突發(fā)菌株進(jìn)行篩選,并非所有的藥物都有誘變劑的效果。用藥物對出發(fā)菌株進(jìn)行篩選理論上也是篩選自發(fā)突變菌,由于自發(fā)突變頻率低,成功的概率也很低。 正確的做法應(yīng)該說采用物理如射線、UV或化學(xué)如NTG等誘變劑對出發(fā)菌株進(jìn)行誘變,然后再含有相應(yīng)藥物的平板上篩選。最后在平板上能生長的菌株克隆就是對該藥物具有抗性的突變菌株。 希望能幫你。
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