多酚氧化酶鄰苯三酚比色法(追加)

實驗二十六 植物體內多酚氧化酶活性的測定 一、目的 通過實驗，掌握植物體內多酚氧化酶活性的測定方法。 二、原理 多酚氧化酶是一種含銅的氧化酶，在有氧的條件下，能使一元酚和二元酚氧化產生醌。用分光光度法在525nm波長下測其吸光度，即可計算出多酚氧化酶的活力和比活性。反應式如下： 多酚氧化酶 鄰苯二酚（兒茶酚）＋1∕2 O2 ——————→ 鄰醌 ＋ H2O 三、材料、儀器及試劑 1. 材料：馬鈴薯塊莖等 2. 儀器：UV－1206或UV－1240分光光度計；離心機；恒溫水?。谎欣徎騽驖{機；試管；移液管；紗布袋等。 3. 試劑：聚乙烯吡咯烷酮（PVP）；0.01mol?L－1 pH 6.5磷酸緩

過氧化氫酶活性測定公式計算方法

這樣應該可以了吧 一、實驗目的： （1）掌握SOD酶的提取、分離、檢測一般步驟。 （2）了解酶在提取過程中的兩個參數(shù)：回收率、純化倍數(shù)。 （3）掌握離心機的使用。 二、實驗原理: 鄰苯三酚在堿性條件下，能迅速自氧化，釋放出O2-，生成帶色的中間產物，中間物的積累在滯留30～45s后，與時間成線性關系，一般線性時間維持在4min的范圍內，中間物在420nm波長處有強烈光吸收。當有SOD存在時，由于它能催化O2-與H+結合生成O2和H2O2，從而阻止了中間產物的積累，因此，通過測定光吸收即可求出SOD的酶活性。 三、實驗試劑： 大蒜、冷丙酮、磷酸緩沖液（PH7.8，0.05mol/L)、氯仿-乙醇

鄰苯三酚自氧化，有顏色的中間產物是什么，為什么SOD會抑制中間產物形成？

鄰苯三酚在堿性條件下，能迅速自氧化，釋放出O2-，生成帶色的中間產物，反應開始后反應液先變成黃棕色，幾分鐘后轉綠，幾小時后又轉變成黃色，這是因為生成的中間物不斷氧化的結果。 實驗中測定的是鄰苯三酚自氧化過程中的初始階段，中間物的積累在滯留30-45s后，與時間成線性關系，一般線性時間維持在4min的范圍內，中間物在420nm波長出有強烈光吸收。當有SOD存在時，由于它能催化O2-與H+結合生成O2和H2O2，從而阻止了中間產物的積累，因此，通過計算即可求出SOD的酶活性。 以上是文獻里的 我的理解是O2可以催化中間產物變色，而O2-被SOD作用后產生O2正好可以使中間產物變色，因為它說測定的是

用鄰苯三酚自氧化法時，如果自氧化速率超過0.06-0.08OD/min的話，有什么影響;謝謝

[原理] SOD的活力測定方法很多，常見的有化學法、免疫法和等電點聚焦法。其中化學法應用最普遍，化學法的原理主要是利用有些化合物在自氧化過程中會產生有色中間物和O2 -，利用SOD分解而間接推算酶活力。在化學方法中，最常用的有黃嘌呤氧化酶法，鄰苯三酚法，化學發(fā)光法，腎上腺素法，NBT-還原法，光化學擴增法，Cyte還原法等。其中改良的鄰苯三酚自氧化法簡單易行較為實用?；瘜W發(fā)光法和光化學擴增法不適用于測定Mn-SOD，但對于Cu/Zn-SOD反應極靈敏。Cyte還原法用于Mn-SOD活力測定結果穩(wěn)定，重復性好。但專一性和靈敏度不夠理想，而且需要特殊儀器，實際應用受到限制。亞硝酸鹽形成法與CN—抑

為什么用鄰苯三酚法做體外抗氧化測出空白吸光度比樣液小

可能時間,溫度不同。
鄰苯三酚自氧化法的影響因素較多,如時間,溫度,鄰苯三酚的濃度,緩沖液PH等，討論以上相關因素對自氧化速率的影響,同時,也探討了不同水質對自氧化速率的影響,從而進一步闡明了掌握好實驗條件的重要性。
抗氧化(Anti-Oxidant)即抗氧化自由基的簡稱，包括一系列可有效抑制人體產生的自由基的物質，即便低濃度都可有效抑制人體內的自由基的氧化反應，起到抗衰老、延緩疲勞、加快體能恢復的作用，一定程度上還能夠避免癌癥或其他疾病的產生。自由基也叫游離基，即人體在生活中與外界持續(xù)接觸(如呼吸、污染、輻射等)而不可避免地產生的一種具有強氧化性的原子或基團，與癌癥、衰老以及其他許多疾病的產生都存在一定關聯(lián)，自由基越是過量，人體越不健康，衰老的也越快。人體在產生自由基時，也會同時產生抵抗和抑制自由基的抗氧化物質?？寡趸镔|可由人體天然產生，也可通過食物進行補充。天然的抗氧化物質如維生素C、維生素E、天然蝦青色素等，可從眾多蔬菜、水果、藻類以及蜂蜜、紅酒、鮭魚等食物中攝取。