一混合物中 混有沙門菌的金黃色葡萄桿菌和酵母菌 請巧妙設(shè)計(jì)實(shí)驗(yàn)將每種微生物獲得純培養(yǎng)物

有很多方法分離三種菌，但最簡單的方法就是平板劃線分離法。

平板劃線分離法是把混雜在一起的微生物或同一微生物群體中的不同細(xì)胞，用接種環(huán)在平板培養(yǎng)基表面，通過分區(qū)劃線稀釋分離，而得到較多獨(dú)立分布的單個(gè)細(xì)胞，經(jīng)培養(yǎng)后生長繁殖成單菌落，從而實(shí)現(xiàn)從混合微生物中分離，得到純種的方法。

其步驟為：（省略平板培養(yǎng)基制作過程，就用普通的牛肉膏蛋白胨瓊脂培養(yǎng)基就行）

1、選用平整、圓滑的接種環(huán)，按無菌操作法挑取少量混合菌種（菌液滴或菌落都可以）。

2、先在平板培養(yǎng)基一側(cè)劃3—4條連續(xù)的平行線(線條多少應(yīng)依挑菌量的多少而定)。劃完后應(yīng)立即在酒精燈火焰上燒掉環(huán)上的殘菌，以免因菌過多而影響后面各區(qū)的分離效果。

3、將燒去殘菌后的接種環(huán)在平板培養(yǎng)基邊緣冷卻一下，接種環(huán)通過剛才的劃線區(qū)將菌帶到未劃線的區(qū)域，劃數(shù)條平行線。再從該區(qū)域依此法向未劃線的區(qū)域繼續(xù)劃線。重復(fù)此操作，直到在未劃線的區(qū)域均被劃線。注意下一次劃線時(shí)切勿重新接觸已劃線的區(qū)域，以避免把已劃線區(qū)較濃的菌帶到未劃線區(qū)，影響單菌落的形成。

4、將劃線平板培養(yǎng)皿倒置，于37℃下培養(yǎng)，24小時(shí)后觀察。沙門氏菌的菌落為中等大小、圓形、表面光滑、無色半透明、邊緣整齊。金黃色葡萄球菌（不是桿菌）的菌落厚、有光澤、圓形凸起，直徑0.5~1.0mm。酵母菌的菌落明顯大于上述兩種細(xì)菌。

5、挑取三種菌的菌落，分別轉(zhuǎn)接入無菌平板培養(yǎng)基或試管斜面培養(yǎng)基中，培養(yǎng)觀察。

菌種生產(chǎn)性能鑒定中復(fù)篩的方法

一、微生物工業(yè)對菌種的要求 (一)、微生物工業(yè)的生產(chǎn)水平由三個(gè)要素決定：生產(chǎn)菌種的性能、發(fā)酵及提純工藝條件、生產(chǎn)設(shè)備。其中生產(chǎn)菌種的性能是最重要的因素。 （二）、微生物工業(yè)對菌種的要求是： （1）菌株高產(chǎn)，在較短的時(shí)間內(nèi)發(fā)酵產(chǎn)生大量發(fā)酵產(chǎn)物的能力; （2）在發(fā)酵過程中不產(chǎn)生或少產(chǎn)生與目標(biāo)產(chǎn)品相近的副產(chǎn)品及其他產(chǎn)物; （3）生長繁殖能力強(qiáng)，較強(qiáng)的生長速率，產(chǎn)孢子的菌種應(yīng)該具有較強(qiáng)的產(chǎn)孢子能力; （4）能夠高效地將原理轉(zhuǎn)化為產(chǎn)品; （5）能利用廣泛的原材料，并對發(fā)酵原料成分的波動(dòng)敏感性小; （6）對需要添加的前體物質(zhì)有耐受能力，并且不能將這些前體物質(zhì)作為一般碳源利用; （7）在發(fā)酵過程中產(chǎn)生的泡沫

請問如何從環(huán)境中分離得到以苯為能源、碳源的微生物的純培養(yǎng)物

簡單的篩選肯定不行，最好到一些長期使用苯的實(shí)驗(yàn)室附近的土壤去找，這樣的可能性比較大。剩下的就是篩選分離了，不過苯是毒性很大的，而且不溶于一般的培養(yǎng)基，所以是不是可以看看他的代謝途徑里有沒有次級的代謝產(chǎn)物，最好是能溶于水的。然后用這個(gè)東西進(jìn)行富集和平板培養(yǎng)。厭氧和好氧最好都做。

如果從環(huán)境中分離得到利用苯酚為碳源和能源的微生物純培養(yǎng)物,如何設(shè)計(jì)實(shí)驗(yàn)

一，制作以苯酚為碳源的培養(yǎng)基，分離純化培養(yǎng)微生物！ 二，培養(yǎng)的過程中改造微生物，用物理、化學(xué)、生物的各種方法改變微生物的基因！使它能夠利用苯酚！ 一二兩步循環(huán)進(jìn)行！ 不過苯酚是有毒的化學(xué)物質(zhì)！會抑制微生物的生長！另外苯酚很難被分解！試驗(yàn)很困難！基本上是失敗的！

如何分離到能利用苯作為碳源的細(xì)菌純培養(yǎng)？

(1)從苯含量較高的環(huán)境中采集土樣或水樣；(1)配制培養(yǎng)基，制備平板，一種僅以苯作為唯一碳源(a)，另一種不含任何碳源作為對照(b)；(3)將樣品適當(dāng)稀釋(十倍稀釋法)，涂布入平板；(4)將平板置于適當(dāng)溫度條件下培養(yǎng)，觀察是否有菌落產(chǎn)生；(5)將a平板上的菌落編號并分別轉(zhuǎn)接至b平板，置于相同溫度條件下培養(yǎng)(在b平板上生長的菌落是可利用空氣中co2的自養(yǎng)型微生物)；(6)挑取在a乎板上生長而不在b平板上生長的菌落，在一個(gè)新的a平板上劃線、培養(yǎng)．獲得單菌落，初步確定為可利用苯作為碳源和能源的微生物純培養(yǎng)物；(7)將初步確定的目標(biāo)菌株轉(zhuǎn)接至以苯作為惟一碳源的液體培養(yǎng)基中進(jìn)行搖瓶發(fā)酵實(shí)驗(yàn)，利用相應(yīng)化學(xué)