對不同的培養(yǎng)基滅菌方法有什么異同？

細(xì)菌培養(yǎng)基（如牛肉膏培養(yǎng)基）一級培養(yǎng)基（用于純化保藏菌種） 要嚴(yán)格滅菌（常用高壓蒸氣滅菌法） 二級培養(yǎng)基三級培養(yǎng)基（用于擴(kuò)增及生產(chǎn)） 有的不用嚴(yán)格滅菌，如用于種蘑菇的棉籽殼培養(yǎng)基（加廣譜抗生素滅菌）

影響培養(yǎng)基滅菌的因素

（1）培養(yǎng)基原材料預(yù)濕是否均勻 在采用蒸汽滅菌時，是靠水蒸氣的溫度和穿透能力達(dá)到滅菌的。水分熱傳導(dǎo)性能比許多固體培養(yǎng)基（木屑、糞草等）的熱傳導(dǎo)性能好，如果培養(yǎng)基預(yù)濕適度均勻，在滅菌過程中溫度傳遞較容易達(dá)到均勻；如果培養(yǎng)料預(yù)濕不透，僅在料面形成一層水膜，而蒸汽又不能穿透到培養(yǎng)料的干燥處，那么就達(dá)不到徹底滅菌的效果。因此在培養(yǎng)基配料過程中塊狀培養(yǎng)基（木塊、種木、糞塊）應(yīng)搗碎，水分均勻浸透。

（2）培養(yǎng)基的酸堿度 在培養(yǎng)基含有水的情況下，pH對培養(yǎng)基的滅菌效果有較大的影響。由于氫離子對細(xì)胞壁水解和對細(xì)胞質(zhì)中堿基的親合作用，促成生理反應(yīng)加劇，加快細(xì)胞生命的停止。因此，偏酸性的培養(yǎng)基可以比中性或微堿性的培養(yǎng)基滅菌時間短。

（3）培養(yǎng)基營養(yǎng)成分 在培養(yǎng)基成分中，糖、脂肪和蛋白質(zhì)的存在對微生物有一定的保護(hù)作用。特別是濃度較高的有機(jī)營養(yǎng)物質(zhì)，當(dāng)其表面受熱變性后能形成一層保護(hù)膜影響熱的傳導(dǎo)，從而提高微生物的耐熱性。但這種耐熱性同濃度（即基質(zhì)中含水量）有關(guān)，相反，無機(jī)鹽、堿、酸等則可以削弱微生物的耐熱性，這同提高微生物細(xì)胞壁的導(dǎo)熱性能有關(guān)系。

作為培養(yǎng)食用菌的原料，通過滅菌既要達(dá)到無菌狀態(tài)，又要保持營養(yǎng)成分少破壞。在滅菌過程中要處理好溫度、壓力和時間的關(guān)系，可以根據(jù)在高溫條件下微生物死亡比有機(jī)物破壞來得快的特性，提高滅菌溫度，縮短滅菌時間，達(dá)到既無菌又保護(hù)營養(yǎng)的目的。細(xì)菌抗熱致死溫度和時間關(guān)系見表2。

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表2 細(xì)菌抗熱致死溫度和時間的關(guān)系

（4）滅菌方式和滅菌鍋（灶）的容量 食用菌制種、制袋生產(chǎn)中，培養(yǎng)料（基）滅菌可在高壓滅菌鍋、常壓滅菌鍋（灶）中進(jìn)行。常壓灶滅菌時間長，耗能大，但制作容易，技術(shù)和材料要求低。高壓滅菌設(shè)備須按有關(guān)壓力容器要求選材和憑證制造檢驗，成本高，但滅菌時間短，效率高，比常壓滅菌徹底。根據(jù)實踐經(jīng)驗，固定常壓滅菌灶每次滅菌以1000～2000袋的容量為宜，滅菌灶體積小，灶內(nèi)升溫快，培養(yǎng)基內(nèi)微生物可自繁時間短，培養(yǎng)基內(nèi)pH降低少，滅菌效果更有把握。高壓滅菌只要鍋爐蒸汽量與鍋倉體積相適應(yīng)即可，但蒸汽送氣口的擋氣板應(yīng)當(dāng)隨著進(jìn)汽管口直徑的增大而增大，使蒸汽進(jìn)入鍋內(nèi)大面積擴(kuò)散，這樣可減少菌瓶菌袋棉塞受潮，防止污染。

（5）滅菌鍋（灶）內(nèi)培養(yǎng)基的堆疊方式 鍋內(nèi)菌瓶或菌袋排列形式對滅菌效果影響大，因為塑料袋受熱后變軟，若采用堆柴片式堆疊，在加溫時菌袋之間可能緊貼形成一體，使直徑不足10厘米的菌袋，變成直徑幾十厘米甚至更大的“菌袋”，導(dǎo)致熱傳導(dǎo)由表到里的路程變遠(yuǎn)，結(jié)果延長滅菌時間，影響滅菌效果。菌瓶由于外壁是堅硬的玻璃，瓶與瓶之間有間隙，以致蒸汽較易使各瓶均勻受熱。如果把菌袋改為“井”字形排列，每3～4層以層板相隔開后再往上架疊，這樣容易使蒸汽正常對流，鍋（灶）內(nèi)溫度均勻，穿透培養(yǎng)基較容易，能取得較好的滅菌效果。有的栽培者為了達(dá)到突擊生產(chǎn)的目的，不顧鍋（灶）容量，柴片式過量堆疊菌袋，其結(jié)果不僅滅菌時間拉長，而且效果也不理想?；顒邮綔缇睿莘e可達(dá)3000～5000筒，周圍應(yīng)使用周轉(zhuǎn)筐裝袋，中部用“井”字型排放。

（6）滅菌鍋（灶）內(nèi)的溫度與壓力 高壓滅菌鍋衡量滅菌效果是通過壓力表和溫度計。濕熱蒸汽滅菌的香菇一級種培養(yǎng)基，要求1.08×105帕的壓力，木屑培養(yǎng)基要求1.47×105帕的壓力，這時鍋內(nèi)溫度在121～126℃并維持時間1.5～2小時。在實際操作中，經(jīng)常發(fā)現(xiàn)滅菌不過關(guān)的原因是冷空氣排除不干凈。排除冷空氣有兩種方法，一種是先關(guān)閉氣閥，當(dāng)壓力上升到4.9×104帕，再打開氣閥排除冷空氣。這種方法要注意棉塞用牛皮紙和棉線扎緊，防止排氣減壓時，棉塞沖出試管口或瓶口；二是從加溫開始就打開氣閥，當(dāng)氣閥出口蒸汽直立沖出、氣溫較高時才關(guān)閉閥門，進(jìn)入滅菌狀態(tài)。

常壓滅菌時無排氣問題，但要注意常壓滅菌灶結(jié)構(gòu)對氣流溫度的影響，方形灶內(nèi)一般靠近盛水鍋的4個邊角氣溫最低，在建灶時，沿著鍋沿把四個角落砌成圓形，以便灶內(nèi)均衡升溫，達(dá)到同步滅菌的目的。常壓滅菌溫度越高，滅菌所需時間越短，微生物死亡時間與滅菌所需時間關(guān)系見表3。

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表3 常壓滅菌的微生物致死時間

實驗室一般采用什么滅菌方法,不同培養(yǎng)基的滅菌條件

金屬器具先用酒精擦拭，之后干熱滅菌，使用時需燒灼；塑料可用高溫滅菌；有機(jī)溶劑需用過濾滅菌；雙手及操作臺面可用酒精擦拭，臺面及操作室還需紫外滅菌；培養(yǎng)基需用濕熱高溫滅菌，至于對待不同的培養(yǎng)基滅菌條件都有所不同，如植物組培使用的培養(yǎng)基與微生物中使用的就不同，具體的應(yīng)查閱相關(guān)文獻(xiàn)。

培養(yǎng)基和培養(yǎng)皿的滅菌方法為什么不一樣

培養(yǎng)皿可以高壓蒸汽滅菌。只是培養(yǎng)基一般是液體，滅菌只能濕熱。 倒入培養(yǎng)皿滅菌不是容易灑出來么，，，，

培養(yǎng)皿和培養(yǎng)基的滅菌方法有什么不同

培養(yǎng)皿滅菌方法有干熱滅菌和濕熱滅菌，干熱滅菌方法：包在鐵質(zhì)容器內(nèi)，進(jìn)行高溫烘烤。濕熱用牛皮紙包起來放在高壓鍋中進(jìn)行高壓滅菌。 培養(yǎng)基滅菌方法有濕熱滅菌、煮沸滅菌和過濾除菌，煮沸滅菌在電磁爐或者微波爐內(nèi)進(jìn)行煮沸即可，過濾除菌適用于不能高溫處理的培養(yǎng)。